蛋白泛素化修饰
产品介绍:
蛋白质泛素化修饰(Ubiquitylation)是一种常见的蛋白质翻译后修饰,是指一个或多个泛素分子(Ubiquitin,由76个氨基酸组成的多肽)在一系列特殊的酶作用下,将细胞内的蛋白质分类,从中选出靶蛋白分子,并对靶蛋白进行特异性修饰的过程。泛素化修饰是一种重要的翻译后修饰,泛素-蛋白酶体系统介导了真核生物80%~85%的蛋白质降解。除参与蛋白质降解之外,泛素化修饰还参与了细胞周期、增殖、细胞凋亡、分化、转录调控、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动的调控。泛素化与肿瘤、心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的一个重大成果,它已然成为研究、开发新药物的新靶点。技术原理是首先将蛋白样本酶解成肽段混合物,然后使用液相色谱对酶解后的肽段混合物进行组分分离以降低样本复杂程度,然后通过高质量的泛素化修饰抗体和生物材料对修饰肽段进行富集,最后上样至液相色谱-串联质谱中进行分析定量。
泛素化修饰过程
技术优势:
(1) 高特异性的修饰抗体
(2) 高分辨率、高灵敏度质谱仪
(3) 鉴定通量高
(4) 可与代谢组学等进行多组学联合分析
应用方向:
♦ 医学研究
疾病机理机制研究、诊断分子标志物、药物靶点;
♦ 动物研究
动物生殖发育机制、动物疾病机理、动物营养代谢与调控、动物毒理研究;
♦ 植物研究
植物生殖发育机制、非生物胁迫应答机理、植物抗病机理、作物改良;
♦ 微生物
致病机制及耐药性研究、胁迫相关蛋白筛查及机制研究、环境作用机理。
样本要求:
适用产品 |
样本类型 |
样本 |
推荐送样量 |
最低送样量 |
蛋白修饰组(磷酸化,乙酰化,泛素化,糖基化) |
固体(动物) |
动物组织(肌肉、肝脏、脐带等) |
500mg |
400mg |
脂肪组织 |
5g |
4g |
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脑组织 |
3g |
2g |
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固体(植物) |
植物组织 |
1g |
800mg |
|
幼嫩叶片 |
1g |
800mg |
||
侧根 |
5g |
4g |
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苔藓 |
3g |
2g |
||
软质果皮 |
3g |
2g |
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液体 |
血清/血浆 |
300μL |
/ |
|
细胞上清 |
30mL |
/ |
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外泌体 |
100μL |
80μL |
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细胞 |
细胞 |
1×107 |
1×107 |
|
蛋白质 |
蛋白质 |
1mg |
800μg |
研究思路:
Proteome-wide analysis of USP14 substrates revealed its role in hepatosteatosis via stabilization of FASN
USP14底物的蛋白质组分析揭示了其通过稳定FASN在肝脂肪变性中的作用
期刊:Nat Commun,发表时间:2018.11,影响因子:14.919
研究背景:
泛素特异性蛋白酶14(USP14)是对蛋白质组稳态至关重要的主要蛋白酶体相关去泛素化酶之一。然而,USP14的底物仍然很大程度上未知,阻碍了对其功能作用的理解。本文中对USP14底物筛选进行了全面的蛋白质组、泛素化蛋白组和相互作用分析。生物信息学分析揭示了USP14广泛的新潜在作用,尤其是在脂质和碳水化合物代谢中。
研究思路:
研究结果:
响应USP14 KD改变的蛋白质组和泛素组的功能注释
研究结论:
本研究发现USP14的过度表达促进了小鼠肝脏甘油三酯的积累,而USP14的基因消融或药物抑制改善了肥胖小鼠的肝脂肪变性、高血糖和胰岛素抵抗。此发现首次揭示了USP14稳定脂肪酸合成酶在肝脂肪变性中不可或缺的作用。
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