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氨基酸代谢谱检测

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产品描述

  1.产品简介:

 

氨基酸是含有碱性氨基和酸性羧基的一类有机化合物的通称。氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位。其中氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸大部分为α-氨基酸。氨基酸对于植物生长有重要作用。氨基酸能够促进植物根系生长,壮苗、健株、增强叶片的光合功能及作物的抗病虫害能力,对多种作物均有较显著的增产效果。迈维代谢建立了基于LC-MS/MS平台的氨基酸分析方法,可绝对定量检测94种氨基酸。

 

 

  2.应用领域:

 

  ◆ 营养品质的研究

   植物生长发育的研究

  ◆ 生物胁迫抗病研究(抗虫、抗病)

  

  3.技术特点:

 

  ◆ 定性定量准:标准品绝对定量,r≥0.99。

   灵敏度高:使用AB Sciex QTRAP ® 6500 LC-MS/MS平台,灵敏度可达pg级。

  ◆ 覆盖全:一次可检测94种氨基酸。

 

  4.技术路线:

 

  5.技术参数

 1.样品类型
  a.细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存;
  b.叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存;
  c.果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30 min内)转移至室内,分离样品放入液氮中,之后-80°保存。


2.混合取样
  每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到10ml离心管中,并迅速放入液氮中。


3.样品重量和重复
  新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本量≥0.6g。
  准备3份及以上生物学重复。


4.储存和运输
  干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输)。

 

6.案例解析
 

大豆Rhg1氨基酸转运蛋白基因通过改变谷氨酸稳态和茉莉酸诱导大豆对胞囊线虫的抗性


方案设计:
1.基于序列和表达模式的分析,预测Rhg1-GmAAT编码氨基酸转运蛋白,其主要在脉管系统中表达。
2.进行生长抑制测定以评估植物对氨基酸毒性水平的耐受性,并发现Rhg1-GmAAT可能影响Glu的转运。
3.韧皮部和木质部中Glu含量的测定结果支持Rhg1-GmAAT在体内作为氨基酸转运蛋白起作用的假设。
4.用Glu处理大豆根部显着激活了JA生物合成基因的转录,使用JA生物合成抑制剂nPG来抑制天然SCN抗性大豆的JA途径。这表明增加的Glu含量可能刺激大豆体内JA生物合成。
5.对转基因Rhg1 GmAAT过表达大豆植物的根进行了RNA-Seq和代谢物分析,表明Rhg1-GmAAT介导了Glu从芽到根的转运,Glu在根中的积累和JA途径的上调,共同调控抗性大豆种质中的SCN抗性。


结果分析:
1 本研究发现,Rhg1是一种重要的基因座,有助于抗大豆胞囊线虫(SCN),文章报告了Glyma的功能表征,虽然没有证明Rhg1-GmAAT在Glu转运中的直接作用,但多个证据表明Rhg1-GmAAT影响大豆中的Glu耐受性和运输。
2 . 运用转录组学和代谢物组相结合的方法,分析表明Rhg1-GmAAT的过表达激活了茉莉酸途径,表明JA途径可能在Rhg1介导的对SCN的抗性中起作用。该研究结果有助于阐明Rhg1在大豆中对SCN的抗性机制。

野生型和Rhg1-GmAAT-OX系gm-3叶片韧皮部渗出物,根木质部分泌物,叶和根中的氨基酸含量。

 

参考文献
Wei Guo, Feng Zhang, Aili Bao. et al.The soybean Rhg1 amino acid transporter gene alters glutamate homeostasis and jasmonic acid-induced resistance to soybean cyst nematode . Molecular Plant Pathology, 2018.

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