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靶向检测

技术特点:仪器平台:AB Sciex QTRAP® 6500 LC-MS/MS 样本要求:建议量>1g,最少量>0.3g,3份及以上生物学重复。 项目周期:具体根据项目情况而定,一般45自然日。 三大质控:(1)空白:清除仪器中残留杂质,提供一个稳定的检测环境,同时也是对仪器稳定性的监控。 (2)混标:混标主要是监控仪器的稳定性。 (3)随机样本重复:监控整个提取过程的稳定性。
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产品编号
zw014
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产品描述

  1. 产品简介

       靶向代谢组学,针对特定某一物质或某一类代谢物进行检测的代谢组学方法,以标准品为参照,利用多反应监测(MRM)技术对目标代谢物进行准确的定性定量分析。相对于全代谢组分析,靶向代谢组学具有特异性强,灵敏度高和定量准确等特点。


  MRM技术原理:MRM技术是基于三重四极杆质谱原理,第一重四极杆首先筛选目标物质的前体离子(母离子),排除掉其他分子量物质对应的离子以初步排除干扰;前体离子经碰撞室诱导电离后断裂形成很多碎片离子,碎片离子再通过三重四极杆过滤选择出所需要的一个特征碎片离子,排除非目标离子干扰,使定量更为精确,重复性更好。

 

 
    质谱多反应监测模式(MRM)示意图


  用户提供一组给定的代谢物列表,比如某一条或者某几条代谢通路的代谢物,我公司将根据这些化合物进行定性定量研究。

  2. 技术特点

   仪器平台:AB Sciex QTRAP® 6500 LC-MS/MS

   样本要求:建议量>1g,最少量>0.3g,3份及以上生物学重复。

   项目周期:具体根据项目情况而定,一般45自然日。

   三大质控:

  (1)空白:清除仪器中残留杂质,提供一个稳定的检测环境,同时也是对仪器稳定性的监控。

  (2)混标:混标主要是监控仪器的稳定性。

  (3)随机样本重复:监控整个提取过程的稳定性。

 

  3.技术路线

 

 

  4. 样品要求

  1.样品类型

  a.细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存;

  b.叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存;

  c.果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30 min内)转移至室内,分离样品放入液氮中,之后-80°保存。

  2.混合取样

  每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到钻孔的10ml离心管中,并迅速放入液氮中。

  3.样品重量和重复

  新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本建议量>1g,最少量>0.6g。

  准备3份及以上生物学重复。

  4.储存和运输

  干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输)。

 

  5.FAQ

  1. 做靶向是否需要提供标准品,标准品的规格要求

  靶向项目都需要客户提供标准品,标准品的纯度要求大于90%,规格大于1mg。

  2. 哪些物质适合我们开发?

  物质沸点高不易挥发、受热不稳定和分子量大(200—1000Da)的有机化合物,如甜菜红素、硒代蛋氨酸、L-硒代胱氨酸、熊果苷等。

  3. 开发流程。

  客户提供物质咨询单,我们评估开发难度。标准品开发时挑选2-3个离子对,然后在生物学样本中利用开发离子对检测并采集EPI和标准品的EPI进行核对,挑选响应度高的离子对对物质进行定量。

 

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