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植物激素检测

植物激素是指由植物自身代谢产生的一类有机物质,并从产生部位移动到作用部位,在极低浓度下就有明显生理效(促进或抑制)的微量小分子物质,也被称为植物天然激素或植物内源激素。迈维代谢建立了基于LC-MS/MS平台外标+同位素内标的植物激素分析方法,可检测包括生长素 (Auxin)、细胞分裂素 (Cytokinins,CKs)、脱落酸 (Abscisic acid,ABA)、茉莉酸 (Jasmonates,JAs)、水杨酸 (Salicy acid,SA)、赤霉素(Gibberellins,GAs)、乙烯(Ethylene)、油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)、独脚金内酯(strigolactones, SLs)在内的9大类48种植物激素。目前,积累了600+个项目覆盖200+物种的项目经验,已发表NC、PBJ、NP、JEB等多篇论文。
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  1. 产品简介

  植物激素是指由植物自身代谢产生的一类有机物质,并从产生部位移动到作用部位,在极低浓度下就有明显生理效(促进或抑制)的微量小分子物质,也被称为植物天然激素或植物内源激素。迈维代谢建立了基于LC-MS/MS平台外标+同位素内标的植物激素分析方法,可检测包括生长素 (Auxin)、细胞分裂素 (Cytokinins,CKs)、脱落酸 (Abscisic acid,ABA)、茉莉酸 (Jasmonates,JAs)、水杨酸 (Salicy acid,SA)、赤霉素(Gibberellins,GAs)、乙烯(Ethylene)、油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)、独脚金内酯(strigolactones, SLs)在内的9大类48种植物激素。目前,积累了600+个项目覆盖200+物种的项目经验,已发表NC、PBJ、NP、JEB等多篇论文。

 

 

 

  2. 应用领域

  ◆ 生物胁迫抗病研究(抗虫、抗病)

  ◆ 非生物胁迫研究(抗旱、耐抗冷)

  ◆ 植物生长发育(分化成熟衰老凋亡)研究

  ◆ 作物农艺性状精细调控网络研究

  ◆ 光形态建成研究

 

  3. 技术特点

  分析平台:AB Sciex QTRAP ® 6500 LC-MS/MS

  检测模式:MRM

  离子源 :ESI

  检测精度:pmol

  线性:R2>0.99

 

  4. 技术路线

  常规处理

 

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  衍生化处理

 

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  5. 样品要求

  1.样品类型

  a.细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存;

  b.叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存;

  c.果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30 min内)转移至室内,分离样品放入液氮中,之后-80°保存。

  2.混合取样

  每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到钻孔的10ml离心管中,并迅速放入液氮中。

  3.样品重量和重复

  新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本建议量>1g,最少量>0.6g。

  准备3份及以上生物学重复。

  4.储存和运输

  干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输)。

 

  6. 文章案例

  标题:氨基酸通透酶OsAAP5调控水稻分蘖数及产量

  方案设计:

  1. 对拥有不同分蘖数的306个品种的OsAAP5启动子序列进行分析。

  2.对ZH11进行OsAAP5过表达和RNA干扰转基因处理。

  3.GUS染色、亚细胞定位、氨基酸摄入实验、细胞分裂素和生长素检测以及CRISPR处理,验证OsAAP5调控水稻分蘖机理。

  结果分析:

  1. 研究者发现OsAAP5启动子序列在籼稻和粳稻中存在差异,OsAAP5在粳稻中表达量高,由此造成粳稻分蘖数少于籼稻。

  2. 通过对粳稻ZH11进行OsAAP5过表达和RNA干扰处理,对不同转基因株系进行多个方面深入研究,并通过对细胞分裂素和生长素进行检测,表明OsAAP5可能介导碱性氨基酸(Lys和Arg)和中性氨基酸(Val和Ala)的转运从而影响细胞分裂素通路,进而调控水稻分蘖及产量。

 

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图1. OsAAP5对CK浓度的影响

 

  7.参考文献

  Jie Wang, Bowen Wu, Kai Lu. et al.The amino acid permease OsAAP5 regulates tiller number 26 and grain yield in rice . Plant Physiology, 2019, 23, 628-640.

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