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植物激素检测

植物激素是指由植物自身代谢产生的一类有机物质,并从产生部位移动到作用部位,在极低浓度下就有明显生理效(促进或抑制)的微量小分子物质,也被称为植物天然激素或植物内源激素。迈维代谢建立了一种基于LC-MS/MS平台的植物激素分析方法,高通量检测包括生长素 (Auxin)、细胞分裂素 (Cytokinins,CKs)、脱落酸 (Abscisic acid,ABA)、茉莉酸 (Jasmonates,JA)、水杨酸 (Salicy acid,SA)、赤霉素(Gibberellin,SA)、乙烯(Ethylene)和油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)在内的41种8大类植物激素。定量分析采用同位素内标法,可获得植物激素绝对含量。通过高效的样品预处理技术对植物激素进行富集、纯化,结合超高效液相色谱(UPLC)出色的分离能力和串联质谱(MS/MS)的高选择性,可有效降低复杂的样品基质对检测的干扰,进而提高植物激素的检测灵敏度,确保分析结果的可靠性。
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zw007
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产品描述

  1. 产品简介

迈维代谢39种植物激素数据库(MWDB)

 

NO.

Phytohormone

简称

中文名称

分类

1

Indole-3-acetic acid

IAA

吲哚-3-乙酸

Auxin

2

Methyl indole-3-acetate

ME-IAA

吲哚-3-乙酸甲酯

Auxin

3

3-Indolebutyric acid

IBA

吲哚-3-丁酸

Auxin

4

Indole-3-carboxaldehyde

ICAld

吲哚-3-甲醛

Auxin

5

Indole-3-carboxylic acid 

ICA

3-吲哚甲酸

Auxin

6

N6-Isopentenyladenine

IP

异戊烯腺嘌呤

CK

7

trans-Zeatin

tZ

反式玉米素

CK

8

cis-Zeatin

cZ

顺式玉米素

CK

9

Dihydrozeatin

DZ

二氢玉米素

CK

10

Methyl jasmonate

MEJA

茉莉酸甲酯

JA

11

Jasmonic acid

JA

茉莉酸

JA

12

Dihydrojasmonic acid

H2JA

二氢茉莉酸

JA

13

Jasmonoyl-L-Isoleucine

JA-ILE

茉莉酸-异亮氨酸

JA

14

Salicylic acid

SA

水杨酸

SA

15

Abscisic acid

ABA

脱落酸

ABA

16

Gibberellin A1

GA1

赤霉素 1

GA

17

Gibberellin A3

GA3

赤霉素 3

GA

18

Gibberellin A4

GA4

赤霉素 4

GA

19

Gibberellin A5

GA5

赤霉素 5

GA

20

Gibberellin A6

GA6

赤霉素 6

GA

21

Gibberellin A7

GA7

赤霉素 7

GA

22

Gibberellin A8

GA8

赤霉素8

GA

23

Gibberellin A9

GA9

赤霉素9

GA

24

Gibberellin A12

GA12

赤霉素12

GA

25

Gibberellin A15

GA15

赤霉素15

GA

26

Gibberellin A19

GA19

赤霉素19

GA

27

Gibberellin A20

GA20

赤霉素20

GA

28

Gibberellin A24

GA24

赤霉素24

GA

29

Gibberellin A29

GA29

赤霉素29

GA

30

Gibberellin A34

GA34

赤霉素34

GA

31

Gibberellin A44

GA44

赤霉素44

GA

32

Gibberellin A51

GA51

赤霉素51

GA

33

Gibberellin A53

GA53

赤霉素53

GA

34

1-Aminocyclopropanecarboxylic acid

ACC

1-氨基-环丙烷羧酸

Ethylene 

35

Brassinolide

BL

油菜素内酯

BR

36

Campesterol

CS

菜油甾醇

BR

37

28-norbrassinolide

28-norBL

28-去甲油菜素内酯

BR

38

28-norcastasterone

28-norCS

28-去甲油菜甾醇

BR

39

28-Homobrassinolide

28-homoBL

高油菜素内酯

BR

 

  植物激素是指由植物自身代谢产生的一类有机物质,并从产生部位移动到作用部位,在极低浓度下就有明显生理效(促进或抑制)的微量小分子物质,也被称为植物天然激素或植物内源激素。迈维代谢建立了一种基于LC-MS/MS平台的植物激素分析方法,高通量检测包括生长素 (Auxin)、细胞分裂素 (Cytokinins,CKs)、脱落酸 (Abscisic acid,ABA)、茉莉酸 (Jasmonates,JA)、水杨酸 (Salicy acid,SA)、赤霉素(Gibberellin,SA)、乙烯(Ethylene)和油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)在内的39种8大类植物激素。定量分析采用同位素内标法,可获得植物激素绝对含量。通过高效的样品预处理技术对植物激素进行富集、纯化,结合超高效液相色谱(UPLC)出色的分离能力和串联质谱(MS/MS)的高选择性,可有效降低复杂的样品基质对检测的干扰,进而提高植物激素的检测灵敏度,确保分析结果的可靠性。

 

  2. 应用领域

  ◆ 生物胁迫抗病研究(抗虫、抗病)

  ◆ 非生物胁迫研究(抗旱、耐抗冷)

  ◆ 植物生长发育(分化成熟衰老凋亡)研究

  ◆ 作物农艺性状精细调控网络研究

  ◆ 光形态建成研究

 

  3. 技术特点

  分析平台:AB Sciex QTRAP ® 6500 LC-MS/MS

  检测模式:MRM

  离子源 :ESI

  检测精度:pmol

  线性:R2>0.99

 

  4. 技术路线

  常规处理

 

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  衍生化处理

 

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  5. 样品要求

  1.样品类型

  a.细胞,取样后离心,去除培养基,立即放入液氮中,之后-80°保存;

  b.叶片、茎、花等,取下后立即放入液氮中,之后-80°保存;

  c.果实的果肉、果皮等,如果野外现场不具备分离条件,需尽快(30 min内)转移至室内,分离样品放入液氮中,之后-80°保存。

  2.混合取样

  每份样品混合来自至少3株以上的组织。以水稻叶片为例:取同一时期,表型基本一致的同一个部位的1片叶片,同时取6株,放到钻孔的10ml离心管中,并迅速放入液氮中。

  3.样品重量和重复

  新鲜的、干净的植物样品(鲜样),样本建议量>1g,最少量>0.6g。

  准备3份及以上生物学重复。

  4.储存和运输

  干冰运输(以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输)。

 

  6. 文章案例

  标题:氨基酸通透酶OsAAP5调控水稻分蘖数及产量

  方案设计:

  1. 对拥有不同分蘖数的306个品种的OsAAP5启动子序列进行分析。

  2.对ZH11进行OsAAP5过表达和RNA干扰转基因处理。

  3.GUS染色、亚细胞定位、氨基酸摄入实验、细胞分裂素和生长素检测以及CRISPR处理,验证OsAAP5调控水稻分蘖机理。

  结果分析:

  1. 研究者发现OsAAP5启动子序列在籼稻和粳稻中存在差异,OsAAP5在粳稻中表达量高,由此造成粳稻分蘖数少于籼稻。

  2. 通过对粳稻ZH11进行OsAAP5过表达和RNA干扰处理,对不同转基因株系进行多个方面深入研究,并通过对细胞分裂素和生长素进行检测,表明OsAAP5可能介导碱性氨基酸(Lys和Arg)和中性氨基酸(Val和Ala)的转运从而影响细胞分裂素通路,进而调控水稻分蘖及产量。

 

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图1. OsAAP5对CK浓度的影响

 

  7.参考文献

  Jie Wang, Bowen Wu, Kai Lu. et al.The amino acid permease OsAAP5 regulates tiller number 26 and grain yield in rice . Plant Physiology, 2019, 23, 628-640.

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