样品选择：选择相同培养条件下，同一培养基培养的不同区域的样品（可以来源不同培养容器），选择 3-6 个区域的样品混合成一个生物学重复；

样品收集：从培养基取出培养过程中的愈伤组织，去除样品中混杂的褐化或者已经形成为叶片、茎等组织的部分（红色方框标记的部分）；

样品保存 ：将同一个生物学重复的样品处理完成后，取 0.6g 放置在适宜大小的离心管中（5ml/10ml），并在管盖和管壁做好标记，液氮中速冻 15min 后，-80℃冰箱暂时保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般快递时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

样品选择：对生长中的大型真菌样品（野外或培养型）的不同生长周期进行选择，根据大型真菌生长状态进行区分，选择 6 个以上的单个菌体进行一个生物学样品的混合；

样品收集：从培养基或者野外采集好真菌样品，使用 PBS/RNase-free 水对菌体进行清洗，去除菌体上的土壤、培养基等杂质，将菌体沿垂直轴的中心线进行切割，切割成 1-2cm 大小的块状；

样品保存 ：将同一个生物学重复的样品切割完成后，取 0.6g 放置在适宜大小的离心管中（10ml/15ml），并在管盖和管壁做好标记，液氮中速冻 15min 后，-80℃冰箱暂时保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般快递时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

样品选择：选择液体培养基培养的藻类样品；

生长周期确认：使用分光光度计对生长中的藻类样品进行OD值测定，选择藻类生长的最优时期；也可以使用细胞计数仪对培养基中藻体浓度进行测定，一般推荐生长的浓度达到 1×106-1×107；

样品收集：取一定体积培养液样品于离心管（10ml/15ml/50ml）中，使用 4℃、8000g 进行离心 5-10min，去除上清；收集藻体也可以使用抽滤机进行；

样品清洗：加入适宜体积预冷的去离子水，去离子水的体积约为沉淀的 2-3 倍，震荡混匀，充分震散块状的藻体后 4℃、8000g 进行离心 5-10min，去除上清，该清洗步骤重复 2 次，共清洗 3 次，清洗完成后将样品置于液氮中速冻 5-10min，-80℃冰箱保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般快递时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间

样品选择：优先选择正常生长发育的植株（因为胁迫处理使得植株生长状态较差的也可以进行取样，尽量避免选择因为处理时间过久已经死亡的植株），从培养植株中选择 3-6 株长势一致植株作为一个生物学重复样品的来源，避免因为个体差异过大 带来的差异；根据实验目的选择花开放的不同时期（花苞、初开、盛开期等）；

样品收集：从选定为一个生物学重复来源的不同植株的花组织中，选取 5-6 瓣花瓣（若花的数目不多，可以多选择几瓣，由于花瓣的含水量较高，尽量取得样品量多一些）混合形成一个样品；

样品保存 ：装入大小适合的离心管中，液氮速冻 5-10min，-80℃冰箱保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，
建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

样品选择：优先选择正常生长发育的植株（因为胁迫处理使得植株生长状态较差的也可以进行取样，尽量避免选择因为处理时间过久已经死亡的植株）；从培养植株中选择 3-6 株长势一致植株作为一个生物学重复样品的来源，避免因为个体差异过大带来的差异；

样品收集：从选定为一个生物学重复来源的不同植株相对应的同一位置（光照同一方向等）上，选取 1-2 个果实，使用手术刀分离出果实中研究的部分，关注果皮则使用手术刀尽可能少带一些果肉取得果皮，关注果肉则剔除果皮后将果肉切割成 1-2cm 的块状进行混合，带核的果实不关注果核需要尽可能去除果核，带种子的果实不关注种子则需要去除种子；

样品保存 ：装入大小适合的离心管（15ml/50ml）中，液氮速冻 5-10min，-80℃冰箱保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

样品选择：优先选择正常生长发育的植株（因为胁迫处理使得植株生长状态较差的也可以进行取样，尽量避免选择因为处理时间过久已经死亡的植株）；从培养植株中选择 3-6 株长势一致植株作为一个生物学重复样品的来源，避免因为个体差异过大带来的差异；

样品收集：从培养土或者试验田中挖出植株，在流水中冲洗干净培养土及其他杂质后，用 PBS/RNase-free 水清洗根系 1-2 次，用手术刀切割下根系组织，用吸水纸吸干根上的水分；

样品保存：装入大小适合的离心管中（10ml/15ml/50ml），液氮速冻 5-10min，-80℃冰箱保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

样品选择：优先选择正常生长发育的植株幼嫩部位（因为胁迫处理使得植株生长状态较差的也可以进行取样，尽量避免选择因为处理时间过久已经死亡的植株），从培养植株中选择3-6 株长势一致植株作为一个生物学重复样品的来源，避免因为个体差异过大带来的差异。

样品收集：从选定为一个生物学重复来源的不同植株相对应的同一位置（光照同一方向等）上，选取 3-4 片叶片（根据大小进行数目调整）或者 1-2 节茎组织进行混合，过长的茎秆使用手术刀进行切割，切割为 1-2cm 长度，过大的叶片可以经过液氮速冻后稍微碾碎一点。采集时建议用 PBS/RNase-free 水擦拭或冲洗干净，再用吸水纸吸干样品表面。

样品保存：装入大小适合的离心管中（10ml/15ml），液氮速冻 5-10min，-80℃冰箱保存；

样品寄送：预约干冰进行样品寄送，由于温度不同，干冰挥发的程度不一样，建议按照每天 5kg 干冰进行计算，一般时效性在三天，约需要 15-20kg 左右干冰，准备足量的干冰避免样品冻融。

样本备份：为确保实验的顺利，建议样品备份 1-2 份，避免部分样品降解需要重新取材、制备、送样，耽误实验的时间。

　　一、如果为采集全血后直接离心分装，则步骤如下：

　　血浆样本的分装：

　　1.用 EDTA/肝素抗凝的采血管采集完血液后，颠倒混匀;

　　2.在 4℃条件下 3000 rpm 离心 10 min;

　　3.编号好分装需用的离心管;

　　4.离心完后取出上层血浆，按所得血浆体积分装，每份 100 μL;

　　5.将分装后的样本按顺序分别用冻存盒装好，-80℃保存。

　　血清样本的分装：

　　1.用未加抗凝剂的采血管采集完血液后，静置 30 min;

　　2.在 4℃条件下 3000 rpm 离心 10 min;

　　3.编号好分装需用的离心管;

　　4.离心完后取出上层血清，按所得血清体积分装，每份 100μL;

　　5.将分装后的样本按顺序分别用冻存盒装好，-80℃保存。

　　二、如果为以前保存好的血清或血浆需要分装，则步骤如下：

　　1.将血清或血浆样本放在冰上解冻;

　　2.编号好分装需用的离心管;

　　3.解冻好后按样本体积分装，每份 100μL;

　　4.将分装后的样本按顺序分别用冻存盒装好，-80℃保存。

　　注意事项

　　氧化脂质检测样本需密封避光保存。

　　样本量要求 400 uL/样。脑脊液的采集通常采取脊髓穿刺法：动物轻度麻醉后，侧卧位固定，使头部及尾部向腰部尽量弯曲，剪去第七腰椎周围的被毛。消毒后操作者在动物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮肤，右手持腰穿刺针垂直刺入，当有落空感及动物的后肢跳动时，表明针已达椎管内( 蛛网膜下腔)，抽去针芯,即见脑脊液流出。如果无脑脊液流出，可能是没有刺破蛛网膜。轻轻调节进针方向及角度，如果脑脊液流的太快，插入针芯稍加阻塞，以免导致颅内压突然下降而形成脑疝。收集到的样本分装成 100uL 每管，放入-80℃冰箱保存。

　　样本量要求 500 uL/样。在采集唾液样本前 30 分钟，用饮用水将口腔内的杂物洗漱干净，用舌尖抵住上颚或下颚齿根以富集唾液，向采集漏斗中轻轻吐入唾液，直至液体唾液(非气泡)达到刻度线高度，手持唾液采集管，令其处于直立，并用另一只手协助将采集漏斗选下，从采集管底部取下采集管管盖，并用管盖将采集管拧紧，上下颠倒采集管几次，使唾液与唾液保存液充分混匀，将样本分装成 100uL 每管，放入-80℃冰箱保存。

　　样本量要求 1g 左右。在实验对象死亡后，用无菌解剖刀，在无菌状态下取出整个肠道，切取所需肠段的内容物(条件允许的话，可在无菌操作台进行)，用无菌手术刀挖取内容物，立即放在冰上进行分装并标记，若需要重复测样，需要对样本进行分装，避免反复冻融，采集好的样本立刻放入-80℃冰箱进行低温保存。

　　样本量要求细胞个数>1×10⁷个/样，贴壁细胞需要先用胰酶消化或用细胞刮将细胞刮下，样本转移到EP管中，4℃，1000 rpm离心10 min，吸出上清液，将收集到的细胞用适量4℃预冷的PBS清洗，用移液器轻轻吹打，避免剧烈振荡造成细胞破碎，4℃，1000 rpm离心10 min收集细胞，尽量将水分吸干，收集到的细胞放入-80℃冰箱进行低温保存。

　　1)人粪便样本的采集

　　将粪便排泄到干净的容器中，尽量避免尿液、马桶壁等对粪便样本的污染， 取同段样本或将所有样本混匀后再取样，用无菌勺对粪便进行挖取，将适量粪便样本放入无菌保存管中，样本需 1g 左右，对样本进行分装，以避免反复冻融， 采集好的样本立刻放入-80℃冰箱进行保存。

　　2)小鼠/大鼠粪便样本的采集

　　将待取样的小鼠/大鼠放进干净的铺有消毒滤纸的笼子里，排便后立即用灭菌的镊子夹到无菌冻存管中，小鼠粪便样本通常需要 6-8 粒，大鼠粪便样本 1-2 粒，若样本需要重复检测，可用无菌棒混匀后分装成几管，每管至少 200 mg，避免反复冻融，样本采集后立刻放入-80℃冰箱进行低温保存。

　　注意事项

　　根据样本搜集时实际条件的不同，可依次考虑如下几个搜集方式。其中 A 为金标准，B，C 搜集方式会导致一些代谢物的变化，但也可进行代谢组检测。

　　A：样本提供者近 3 个月内不可接受抗生素治疗，以免造成肠道微生物的菌群改变。患者如在家中搜集样本，应该收集完成后迅速放入速冻容器中(干冰盒)并且在 1 天之内将其移到-80℃冻存(金标准)。

　　注：短链脂肪酸检测样本只能参照此标准进行取样。

　　B：将粪便样本保存在 95%乙醇溶液中，4 天内将其移到-80℃冻存。

　　C：将粪便样本保存在干冰中，尽快转入-20℃冰箱保存。

　　取大约 200mg 以上质量的组织样本，用生理盐水清洗组织，将每 100mg 组织样本分装入管中以避免反复冻融，尽快将组织样本保存于液氮速冻。如果达不到液氮温度，尽可能的存放在-80℃冰箱中。

　　注意事项

　　需要注明组织部分，如胃肠道具体哪一段，肺脏具体是哪一叶，肝脏具体是哪一叶，肾脏是髓质还是皮质，肿瘤组织是边缘还是中心等。

　　取尿液大于 1mL，在 4℃保存，静置;取 1mL 尿液进行离心分离，4℃条件下， 10000 rpm，离心 5 min;吸取上清液 100 uL 分装于合适的已编号的 EP 管中， 如此重复分装成多管以避免反复冻融，尽快将尿液保存于-80℃冰箱中。

　　用不含抗凝剂的 5 mL 采血管(红头管)或者含有促凝剂的采血管(黄头管) 采集血样 3 mL，或将采好血样的采血管室温静置(注意：不能振摇采血管)30 min-60 min 使其凝结后，再将采血管放入离心机内，4℃条件下 3000 rpm，离心10 min-15 min(可根据试验方案进行适当调整)，取出采血管置试管架中(冰上操作)，吸取上清液(即血清)100ul 分装于合适的已编号的 EP 管中，如此重复分装成多管血清以避免反复冻融，尽快将血清保存于-80℃冰箱中。

　　用含有 EDTA(紫头管)或肝素(绿头管)的 5 mL 采血管(根据具体实验具体选择)采集血液 3 mL，采血后立即轻轻颠倒混匀采血管 5-10 次，以确保抗凝剂发挥作用，采血后需在 30 min 内尽快离心分离出血浆(若不能尽快离心，采集的血液需放在 4℃冰箱保存，并必须在 8 h 内完成离心及分装)，4℃条件下 3000 rpm 离心 10 min-15 min(可根据试验方案进行适当调整)，取出采血管置试管架中(冰上操作)，吸取上清液(即血浆)100uL 置于合适的已编号的 EP 管中，如此重复分装成多管血清以避免反复冻融，尽快将血浆保存于-80℃冰箱中。