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PRM目标蛋白定量

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产品描述

  1.产品简介

  PRM(平行反应监测,Parallel Reaction Monitoring)是目前靶向蛋白质组学数据采集的主流方法,通过对特异性肽段或目标肽段(如发生翻译后修饰的肽段)进行选择性检测,从而实现对目标蛋白质/修饰肽段的靶向相对定量,通过合成同位素标准肽段,绘制标准曲线,可以实现目标蛋白质的绝对定量(可选)。PRM技术是在多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)技术的基础上演化而来的。它基于高分辨、高精度质谱(如Q-Exactive HF-X等),首先利用四级杆质量分析器的选择检测能力,在一级质谱中(Q1)选择性地检测目标肽段的母离子信息;随后在HCD碰撞池中碎裂;最后进入高分辨、高质量精度分析器中,检测所选择的母离子窗口内的所有碎片的信息。这样即可对复杂样本中的目标蛋白质/肽段进行准确地特异性分析。PRM常用于验证定量蛋白质组学/翻译后修饰蛋白质组学结果,或直接对目标蛋白质进行相对/绝对定量分析。

  2.技术优势:

  质量精度达到ppm级,能够比传统的SRM/MRM更好地排除背景干扰和假阳性,有效提高复杂背景下的检测限和灵敏度;

  对子离子进行全扫描,无需选择离子对和优化碎裂能量,更容易进行方法学建立;

  更宽的线性范围:增加至5-6个数量级;

  通量高:一次检测50个蛋白,不依赖抗体;

  3.技术路线:

  

 

  4.分析内容:

  

 

  5.样本要求:

样本类型 建议样本量 最低样本量 生物学重复
动物组织 100mg 50mg 3-5,临床样本10-30个
血浆/血清 50μL 20μL 临床样本10-30个
细胞 1×106 5×105 3
细胞上清 50mL 30mL 3-5
菌体 500mg 300mg 3-5
蛋白质 100μg 50μg 3-5

 

 

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